【MDS Express】Cleanert PPT蛋白沉淀板產(chǎn)品使用操作

更新時(shí)間：2025-07-18

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Cleanert PPT (Protein Precipitation Plate) 蛋白沉淀產(chǎn)品采用高純蛋白沉淀專用篩板，能夠有效阻截乙腈等常用蛋白沉淀溶劑，避免發(fā)生滲透現(xiàn)象。與傳統(tǒng) PPT 方法相比，不需要額外耗時(shí)的樣品前處理步驟，可實(shí)現(xiàn)生物樣品( 血漿、血清等) 的自動(dòng)化、高通量處理，在完成蛋白沉淀后，施加正壓或負(fù)壓收集流出液，從而實(shí)現(xiàn)血漿（或血清、尿液等）樣品的高通量蛋白去除。

產(chǎn)品特點(diǎn)

操作簡(jiǎn)便快速，孔內(nèi)沉淀；

無滲漏現(xiàn)象，防止樣品過早流出和蛋白沉淀不完-全；

有效去除蛋白干擾，提高分析靈敏度。

操作步驟

準(zhǔn)備實(shí)驗(yàn)

將Cleanert PPT 96蛋白沉淀板放置于收集板上。

注：放置時(shí)沉淀板與收集板缺口端對(duì)齊于左下端，這樣可快速正確調(diào)整放置位置。使左邊孔位顯示為“A-H"，上端顯示為“1-12"，便于查找和標(biāo)識(shí)。

加入沉淀試劑

每孔加入不少于3倍樣品體積的沉淀試劑，如乙腈或甲醇。

注： Cleanert PPT 96蛋白沉淀板設(shè)計(jì)可保證乙腈加入后60 min、甲醇加入后15 min不會(huì)穿透，保證充足的操作時(shí)間。乙腈作為沉淀劑時(shí)，乙腈與樣品建議比例3:1以上；甲醇作為沉淀劑時(shí)，建議比例4:1以上。為保證獲得最佳沉淀效果，建議先加沉淀試劑再加入樣品。

加入待處理樣品

將待處理的血漿、血清等樣品分別加入到蛋白沉淀板各孔中。

注：如需分別添加內(nèi)標(biāo)物、稀釋樣品、加快上樣速度等操作，可預(yù)先將樣品分別移取至另一塊收集板中，使用多位移液槍進(jìn)行移取樣品操作。當(dāng)加入待處理樣品后，會(huì)和沉淀劑迅速作用生成沉淀，后續(xù)操作將不會(huì)引起沉淀板穿透。

蛋白沉淀

將蛋白沉淀板放置于96位漩渦混合器上，調(diào)節(jié)轉(zhuǎn)速到600-800轉(zhuǎn)/min，充分混合5 min，然后靜置5 min。

過濾

使用正壓儀器將沉淀后澄清溶液全部壓入96孔接收板中(壓力推薦為0.03-0.04 MPa)，蓋上硅膠蓋板，防止試劑揮發(fā)，待用于儀器測(cè)試。

注：可根據(jù)樣品粘稠度調(diào)節(jié)壓力；當(dāng)少量孔樣品流速較慢時(shí)也可適當(dāng)提高壓力。

實(shí)驗(yàn)Q&A

我按照操作步驟進(jìn)行的實(shí)驗(yàn)，但是收集到的濾液是渾濁的，可能是什么原因?qū)е碌模?/strong>

如果收集到的溶液出現(xiàn)渾濁的情況，可能是沉淀不充分導(dǎo)致。可以通過調(diào)節(jié)沉淀試劑及用量、延長(zhǎng)沉淀時(shí)間、增加渦旋轉(zhuǎn)速等方式改善。

對(duì)于全血基質(zhì)的細(xì)胞裂解方式有建議嗎？

?建議1：將3份去離子水加入到1份全血樣本中，渦旋3-5秒，以3700 rpm的轉(zhuǎn)速離心10分鐘并收集上清液。

?建議2：在室溫下對(duì)全血樣本進(jìn)行超聲處理15分鐘，然后以3700 rpm的轉(zhuǎn)速離心10分鐘，收集上清液

?建議3：將三份0.1M硫酸鋅/0.1M乙酸銨溶液加入一份全血樣本中。渦旋3-5秒，以3700 rpm的轉(zhuǎn)速離心10分鐘，收集上清液。

上清液收集之后，向蛋白沉淀板中加入3倍體積的乙腈，渦旋板兩分鐘。對(duì)板施加真空并收集流出物，氮吹干燥，在流動(dòng)相中復(fù)溶。

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